代謝工程在芳香族化合物微生物降解研究中的應(yīng)用

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　　工業(yè)技術(shù)的迅猛發(fā)展，給人類社會(huì)帶來(lái)了高度的物質(zhì)文明，但也帶來(lái)了許多負(fù)面效應(yīng)，尤其是對(duì)人類生存環(huán)境造成的危害。芳香族化合物是一類廣泛存在于自然環(huán)境中的化學(xué)物質(zhì)，性質(zhì)穩(wěn)定，具有很大的毒性和致癌、致突變作用，而且一般都有較好的脂溶性，可以在人體和動(dòng)物的脂肪組織內(nèi)積蓄，從而造成長(zhǎng)期的危害。人工合成的芳香族化合物在利用時(shí)不可避免的泄漏到環(huán)境中造成嚴(yán)重的環(huán)境污染，盡管人們已經(jīng)認(rèn)識(shí)到了問(wèn)題的嚴(yán)重性，這一問(wèn)題仍呈上升的趨勢(shì)^[1]。

　　微生物降解環(huán)境污染物由于投資少、占地小又不需特殊設(shè)備而成為最有前途的治理環(huán)境污染的方法。但微生物細(xì)胞在代謝繁殖過(guò)程中，經(jīng)濟(jì)合理地利用和合成自身所需的各種物質(zhì)和能量，這種固有的代謝網(wǎng)絡(luò)相對(duì)實(shí)際應(yīng)用而言其遺傳特性并非最佳,所以有必要對(duì)細(xì)胞的代謝途徑進(jìn)行有目的的改造。

　　1  代謝工程

　　代謝工程的基本理論和應(yīng)用就是在這一背景下發(fā)展起來(lái)的。1991年Bailey^[2]在“Science”上發(fā)表了一篇重要的綜述文章“Toward a Science of Metabolic Engineering”，標(biāo)志著代謝工程作為一門(mén)新學(xué)科的誕生。十多年來(lái)，代謝工程的理論和應(yīng)用迅速發(fā)展。1995年Bailey^[3]又發(fā)表了“Chemical Engineering of Cellular Processes”的長(zhǎng)篇文章，詳細(xì)討論了生物網(wǎng)絡(luò)工程及代謝工程。1996年召開(kāi)了第一次國(guó)際代謝工程會(huì)議(ME-I)。此后，國(guó)際代謝工程會(huì)議定期兩年舉行一次。1998 年出版了國(guó)際上第一部代謝工程教科書(shū)：“Metabolic Engineering : Principles and Methodologies”^[4]。1999年出版了“Metabolic Engineering”^[5]專著。近幾年的主要研究進(jìn)展可參見(jiàn)“Current Opinion in Biotechnology”等綜述性刊物及其他一些刊物上的綜述文章，例如：用代謝工程改進(jìn)染料生產(chǎn)及使用^[6]；乳酸菌的代謝工程^[7,8]；工業(yè)微生物過(guò)程的代謝途徑工程—進(jìn)化、組合生物合成及合理設(shè)計(jì)^[9]；利用基因組學(xué)進(jìn)行反向代謝工程^[10]；代謝通量分析進(jìn)展^[11]。十多年的實(shí)踐表明：代謝工程已經(jīng)成為化學(xué)反應(yīng)工程的一個(gè)新的前沿，代謝工程的應(yīng)用范圍及作用正在不斷擴(kuò)大，已經(jīng)成為菌種改進(jìn)的平臺(tái)技術(shù)。我國(guó)的代謝工程研究也已展開(kāi)，國(guó)家基金委及科技部資助的一些代謝工程研究項(xiàng)目或部分涉及代謝工程內(nèi)容的項(xiàng)目正在進(jìn)行。但總的說(shuō)來(lái)，無(wú)論是政府及企業(yè)的投入、還是研究隊(duì)伍及研究水平等方面看，我國(guó)代謝工程的總體研究水平及應(yīng)用均與國(guó)際先進(jìn)水平有較大差距。

　　代謝工程是一門(mén)利用分子生物學(xué)原理系統(tǒng)分析細(xì)胞代謝網(wǎng)絡(luò)、并通過(guò)DNA重組技術(shù)合理設(shè)計(jì)細(xì)胞代謝途徑及遺傳修飾，進(jìn)而完成細(xì)胞特性改造的應(yīng)用性學(xué)科。其核心內(nèi)容是對(duì)細(xì)胞代謝網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行功利性修飾，以更好地利用細(xì)胞代謝進(jìn)行化學(xué)轉(zhuǎn)化、能量轉(zhuǎn)導(dǎo)和超分子組裝，完成這一過(guò)程首先要對(duì)細(xì)胞的分解代謝和合成代謝中的多步級(jí)聯(lián)反應(yīng)進(jìn)行合理設(shè)計(jì)，然后利用DNA重組技術(shù)強(qiáng)化和(或)滅活控制代謝途徑的相關(guān)基因^[12]。代謝工程把細(xì)胞的生化反應(yīng)看作一個(gè)整體，假定細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)、能量處于一擬穩(wěn)態(tài)，通過(guò)測(cè)定胞外物質(zhì)濃度根據(jù)物料平衡計(jì)算細(xì)胞內(nèi)的代謝流，并針對(duì)細(xì)胞內(nèi)外環(huán)境的不穩(wěn)定性，揭示細(xì)胞代謝的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律。在此基礎(chǔ)上，構(gòu)建新的代謝途徑，將具有特定目的的工程菌應(yīng)用于實(shí)際操作。

　　2  代謝工程在芳香族化合物生物降解中的應(yīng)用

　　利用代謝工程，改變微生物細(xì)胞原有的代謝途徑，提高其降解污染物的能力，對(duì)于控制和治理芳香族化合物的污染具有重要的意義。本文綜述代謝工程在幾類芳香族化合物生物降解中的應(yīng)用。

　　2.1  苯及烷基取代苯的降解

　　苯的降解主要是由苯雙加氧酶攻擊苯環(huán)，形成鄰苯二酚，鄰苯二酚進(jìn)一步通過(guò)間位或鄰位雙加氧酶的作用而產(chǎn)生粘康酸半醛或粘康酸，之后被進(jìn)一步降解。對(duì)于烷基取代苯，取代基團(tuán)的存在使苯環(huán)的降解出現(xiàn)兩種可能：先攻擊苯環(huán)或先攻擊側(cè)鏈。如果側(cè)鏈很長(zhǎng)，微生物就不會(huì)降解苯環(huán)，因?yàn)閭?cè)鏈的氧化已經(jīng)足夠提供生長(zhǎng)的能量；而對(duì)于側(cè)鏈較短的烷基取代苯，一般是通過(guò)加氧酶的作用，在2，3碳位上形成二酚，再由2，3-雙加氧酶或1，2-雙加氧酶將其開(kāi)環(huán)裂解。其中，以甲苯降解酶系統(tǒng)的研究較多。降解途徑如圖1所示。

　　圖1  甲苯的降解途徑

　　甲苯降解酶的基因位于質(zhì)粒pWW0上，可利用不同類型的芳烴如甲苯、二甲苯作為唯一碳源和能源。質(zhì)粒上的代謝基因組成兩個(gè)操縱子，xylCBA編碼降解甲苯和二甲苯為苯甲酸和羥基苯甲酸的酶的基因，xylDLEGFJKIH編碼由苯甲酸和羥基苯甲酸到乙醛和丙酮酸的降解酶的基因。盡管甲苯的途徑具有很廣泛的底物范圍，但它卻不能利用苯作為底物，這限制了對(duì)石油污染物的降解。已有研究表明，克隆編碼甲苯還原酶的基因todC1C2BA，并將重組質(zhì)粒導(dǎo)入P.putida mt-2中，則可徹底降解苯、甲苯和二甲苯^[13]。

　　因此，此類物質(zhì)的降解，主要是經(jīng)由加氧酶的作用，使得苯環(huán)的2，3位羥化，形成不穩(wěn)定的鄰苯二酚類物質(zhì)，然后開(kāi)環(huán)降解。其中加氧酶起很重要的作用。在甲苯降解過(guò)程模擬的基礎(chǔ)上對(duì)代謝流進(jìn)行分析，增加甲苯雙加氧酶的活力可以使穩(wěn)態(tài)流從0.074增加到0.091。所以，增加甲苯雙加氧酶編碼基因的拷貝數(shù)，可以提高降解菌的降解能力；如果將甲苯雙加氧酶編碼基因和基因todC1C2BA同時(shí)引入上述的P.putida mt-2中，其降解能力也會(huì)增強(qiáng)。

　　2.2  酚類的降解

　　苯酚是一種常見(jiàn)的酚類物質(zhì)。苯酚的好氧降解是將苯酚分解為鄰苯二酚，鄰苯二酚由鄰位和間位途徑經(jīng)環(huán)裂解，最后形成三羧酸循環(huán)中間物。厭氧代謝的第一步是將苯酚羧化為4-羥基苯甲酸。苯酚的降解基因通常成簇排列，位于大質(zhì)粒上或染色體上。在好氧菌中，苯酚羥化酶基因是降解苯酚的關(guān)鍵基因，編碼苯酚降解途徑的第一個(gè)酶，將苯酚轉(zhuǎn)化為鄰苯二酚；鄰苯二酚2，3-雙加氧酶(C23 O，間位裂解)，或1，2-雙加氧酶(CatA,鄰位裂解)將鄰苯二酚開(kāi)環(huán)裂解為三羧酸產(chǎn)物^[14，15]。如圖2所示。

　　圖2  苯酚的降解途徑

　　注：CatA為1，2-雙加氧酶；C23 O為2，3-雙加氧酶。

　　Giovanni等^[16]研究了Candida aquaetextoris酵母對(duì)4-壬基苯酚（pNP）的生物降解，結(jié)果顯示，主要的代謝物為對(duì)羥基苯乙烯酸和4-乙酰苯酚。進(jìn)一步的研究認(rèn)為，對(duì)羥基苯乙烯酸可以被繼續(xù)降解，但4-乙酰苯酚則會(huì)積累。通過(guò)分析4-乙酰苯酚的分子結(jié)構(gòu)，可以發(fā)現(xiàn)它是苯酚的對(duì)位衍生物，如果在Candida aquaetextoris酵母中引入苯酚羥化酶基因，使得C.aquaetextoris酵母也可產(chǎn)生苯酚羥化酶，則4-乙酰苯酚也有可能被進(jìn)一步降解；另外，4-壬基苯酚（pNP）也是苯酚的衍生物，苯酚羥化酶基因的引入，也可能使得pNP第一步就發(fā)生羥化，再經(jīng)由開(kāi)環(huán)而被降解?？梢哉J(rèn)為，對(duì)于其他的苯酚衍生物，如果鄰位沒(méi)有被取代，都可以先由苯酚羥化酶羥化，然后再被降解。

　　2.3  氯代芳香族化合物的降解

　　氯代芳香化合物從結(jié)構(gòu)上說(shuō)是指芳香烴及其衍生物中一個(gè)或幾個(gè)氫原子被氯原子取代后的產(chǎn)物，氯原子的引入引起芳烴本身結(jié)構(gòu)改變，造成氯代芳香化合物的生物降解性比芳烴類化合物要低很多。下面介紹氯苯、多氯聯(lián)苯等幾類物質(zhì)的降解。

　　氯苯是化學(xué)性質(zhì)較為穩(wěn)定的一類化合物。因?yàn)槁仍佑休^高的電負(fù)性，強(qiáng)烈吸引苯環(huán)上的電子，使苯環(huán)成為一個(gè)疏電子環(huán)，導(dǎo)致很難發(fā)生親電反應(yīng)。與碳?xì)浠衔锵啾?，由于氯原子的引入其生物降解性大大降低，因此生物處理很難降解氯苯類化合物。但是有些微生物通過(guò)自然變種，或通過(guò)形成誘導(dǎo)酶，能夠?qū)⒙缺筋惢衔锝到饣虿糠洲D(zhuǎn)化。氯苯類化合物降解的關(guān)鍵在于脫氯，根據(jù)脫氯過(guò)程中電子得失，將氯苯類化合物生物降解分為氧化脫氯和還原脫氯。

　　對(duì)于氯取代基在3個(gè)以下的氯苯，好氧條件下的降解基本上是先開(kāi)環(huán)再脫氯。即在雙加氧酶和去氫酶的作用下，將氯苯轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的氯代鄰二酚，再由可使苯環(huán)發(fā)生鄰位裂解的酶催化氯代鄰二酚鄰位開(kāi)環(huán),生成相應(yīng)的氯代粘康酸，此產(chǎn)物在內(nèi)酯化過(guò)程中脫除氯原子并被氧化成氯代馬來(lái)?；宜?，最終進(jìn)入三羧酸循環(huán)。一氯苯的降解^[17]如圖3所示。

　　圖3  一氯苯的降解途徑

　　在雙加氧酶作用下發(fā)生雙羥基化反應(yīng)，生成3-氯鄰二酚。此中間體鄰位裂解后形成2-氯-2,4-二烯-己二酸(即2-氯-粘康酸)。脫氯過(guò)程發(fā)生在粘康酸內(nèi)酯化形成4-羧甲烯基-2-丁烯-4-內(nèi)脂的過(guò)程中。產(chǎn)物含有不飽和雙鍵，可以被逐步還原，生成只含一個(gè)不飽和鍵的順丁烯二?；宜?即馬來(lái)?；宜?和碳鏈完全飽和的3-羰基-己二酸，最終進(jìn)入三羧酸循環(huán)。二氯苯和三氯苯的降解，基本上與一氯苯類似，第一步也是雙氧化作用生成二酚，氧化位點(diǎn)是連續(xù)兩個(gè)沒(méi)有氯取代基的碳原子，再經(jīng)過(guò)開(kāi)環(huán)被降解。但如果氯取代基達(dá)到4個(gè)或更多，則將進(jìn)行先脫氯后開(kāi)環(huán)再脫氯的催化反應(yīng)，即在單加氧酶作用下，由羥基取代氯原子，再經(jīng)過(guò)單加氧酶的進(jìn)一步作用，形成開(kāi)環(huán)裂解的中間體氯代鄰二酚，才能進(jìn)一步降解。

　　在氯苯的降解途徑中，鄰苯二酚是一種不穩(wěn)定的中間物，因此由氯苯到氯代鄰二酚是關(guān)鍵步驟，雙加氧酶和去氫酶是關(guān)鍵酶，根據(jù)代謝工程原理，增加其編碼基因的拷貝數(shù)，加快此一步驟，從而加速氯苯到中間產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化，提高降解速率。同時(shí)，增加裂解酶的活力，可消除鄰二酚的積累，使得整個(gè)途徑順利進(jìn)行。

　　氯苯的還原脫氯^[18]是指得到電子的同時(shí)去掉一個(gè)氯取代基，并釋放出一個(gè)氯陰離子的過(guò)程。其厭氧生物降解機(jī)制主要是在酶催化作用下由氫取代氯，發(fā)生脫氯反應(yīng)，使得氯取代基減少，再通過(guò)氧化脫氯途徑降解。

　　另外，共代謝機(jī)制也是降解氯苯類化合物的一種手段。即選擇易被微生物利用的、與目標(biāo)降解物結(jié)構(gòu)類似的生長(zhǎng)基質(zhì)，誘導(dǎo)微生物產(chǎn)生是目標(biāo)降解物轉(zhuǎn)變的酶^[19]，從而使得氯苯降解。

　　多氯聯(lián)苯（PCBs）是一組有一個(gè)或多個(gè)氯原子取代聯(lián)苯分子中的氫原子而形成的氯代芳香族化合物，有極強(qiáng)的穩(wěn)定性，在自然界中很難被降解，但還是有一些微生物可以降解PCBs的。Seeger^[20]、Arsendorf^[21]、Abramowicz^[22]等研究認(rèn)為，對(duì)于氯取代位點(diǎn)集中在一個(gè)苯環(huán)上的氯代聯(lián)苯，一些細(xì)菌菌株，可通過(guò)在無(wú)氯取代苯環(huán)的2，3碳位上間位開(kāi)環(huán)降解一氯、二氯、三氯及一些四氯聯(lián)苯。降解途徑是在2，3雙加氧酶的作用下生成氯代苯甲酸和4-羥基戊酸，4-羥基戊酸可被降解菌株徹底礦化，氯代苯甲酸需被其他微生物進(jìn)一步降解。一般而言，雙加氧酶優(yōu)先攻擊無(wú)氯取代的苯環(huán)，但如果2，3碳位上無(wú)障礙，氧化反應(yīng)也可以發(fā)生在有氯取代的環(huán)上^[23]。由于自然界中的PCBs降解菌株的修復(fù)效率比較低，所以有必要通過(guò)基因構(gòu)建的方法獲得高效的工程菌。Brenner等^[24]通過(guò)研究，確定了假單胞菌LB400中表達(dá)2，3-聯(lián)苯雙加氧酶（bphA），2，3-二氫雙醇脫氫酶（bphB），2，3-二羥聯(lián)苯1，2-雙加氧酶（bphC）及2羥6氧6苯基2，4-二烯水解酶（bphD）的基因序列，并利用2，3-雙加氧酶途徑和寬宿主范圍的質(zhì)粒構(gòu)建了重組菌株，4個(gè)PCBs降解酶基因的長(zhǎng)度為12.4 kb，含有上述降解酶基因的大腸桿菌可以直接利用PCBs，而且不需要聯(lián)苯誘導(dǎo)。

　　2-氯甲苯（2-chlorotoluene）也是一類較難降解的氯代芳香族化合物。Maria等^[25]對(duì)2-氯甲苯的代謝降解途徑進(jìn)行了深入的研究，并構(gòu)建了可以降解2-氯甲苯的假單胞工程菌。組合的途徑包括：一個(gè)編碼甲苯雙加氧酶基因（todC1C2BA）的片段，從菌株Pseudomonas putida F1的TOD系統(tǒng)獲得，可以將2-氯甲苯轉(zhuǎn)化為2-氯苯甲醛；另一個(gè)片段來(lái)自Pseudomonas putida mt-2菌株的PWW0質(zhì)粒，編碼整個(gè)TOL途徑，表達(dá)的苯甲醇脫氫酶（由xylB編碼）和苯甲醛脫氫酶（由xylC編碼），可以將2-氯苯甲醇轉(zhuǎn)化為2-氯苯甲酸。將上述的TOL和TOD片段組合到單個(gè)的mini-Tn5轉(zhuǎn)座子，再將此轉(zhuǎn)座子整合到2-氯苯甲酸降解菌Pseudomonas aeruginosa PA142和Pseudomonas aeruginosa JB2的染色體上，然后通過(guò)實(shí)驗(yàn)，證明的確可以將2-氯甲苯礦化，具體的降解途徑是：2-氯甲苯轉(zhuǎn)化為2-氯苯甲醇，再轉(zhuǎn)化為2-氯苯甲醛，再轉(zhuǎn)化為2-氯苯甲酸，PA142先將2-氯苯甲酸轉(zhuǎn)化為鄰苯二酚，再經(jīng)由三羧酸循環(huán)而降解；而JB2則將2-氯苯甲酸轉(zhuǎn)化為3-氯鄰苯二酚，然后由三羧酸循環(huán)降解。但實(shí)驗(yàn)同時(shí)證明，PA142和JB2都不能將2-氯甲苯作為唯一的碳源。如圖4所示。

　　圖4  2-氯甲苯的降解途徑

　　（圖中：todC1C2BA為編碼甲苯雙加氧酶的基因；xylB為苯甲醇脫氫酶；xylC為苯甲醛脫氫酶；JB2和PA142為2-氯苯甲酸降解菌）

　　2.4  多環(huán)芳烴的降解

　　多環(huán)芳烴（PAHs）是指2個(gè)或2個(gè)以上的苯環(huán)稠合在一起的一類化合物，在環(huán)境中的性質(zhì)穩(wěn)定，具有強(qiáng)烈的毒性。PAHs不易被微生物降解，但不是不能降解。在微生物分泌的單加氧酶和雙加氧酶催化作用下，把氧加入到苯環(huán)上，形成C-O鍵，再經(jīng)過(guò)加氫、脫水等作用而使C-C鍵斷裂，苯環(huán)數(shù)減少。其中真菌產(chǎn)生單加氧酶，加一個(gè)氧原子到苯環(huán)上，形成環(huán)氧化物，然后，加入H₂O產(chǎn)生反式二醇和酚。細(xì)菌產(chǎn)生雙加氧酶，加兩個(gè)氧原子到苯環(huán)上，形成過(guò)氧化物，氧化為順式二醇，脫氫產(chǎn)生酚。最后，這些中間產(chǎn)物由微生物降解^[26]。

　　萘是最簡(jiǎn)單的多環(huán)芳烴，生物降解途徑與其他芳香化合物基本相同，第一步是雙加氧酶進(jìn)攻苯環(huán)形成1，2 羥基萘，隨后在第1和第9個(gè)碳原子間斷裂開(kāi)環(huán)，苯環(huán)數(shù)減少。其他多環(huán)芳烴的結(jié)構(gòu)相對(duì)要復(fù)雜，降解也較難。Juhasz等^[27]研究了細(xì)菌和真菌降解苯并(ａ)芘的機(jī)理，結(jié)果顯示，細(xì)菌雙加氧酶從不同位點(diǎn)進(jìn)攻苯并(ａ)芘,先是形成順二氫二醇型中間產(chǎn)物,然后是一系列的酶促反應(yīng)；真菌代謝苯并(ａ)芘最初的產(chǎn)物是反二氫二醇，代謝中起作用的都是P-450單加氧酶。根據(jù)代謝工程原理，可以通過(guò)分析細(xì)菌和真菌的代謝網(wǎng)絡(luò)，確定雙加氧酶和單加氧酶所對(duì)應(yīng)的基因，并增加這些基因的拷貝數(shù)，強(qiáng)化苯并(ａ)芘到中間產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化。

　　3 討  論

　　綜上所述，各類芳香族化合物的生物降解途徑基本上是一致的，先由雙加氧酶或單加氧酶的作用，形成鄰二酚類物質(zhì)，然后在鄰苯二酚2,3雙加氧酶（C23 O）或1,2雙加氧酶（CatA）的作用下，開(kāi)環(huán)進(jìn)入后續(xù)降解步驟。Eltis等的研究也證實(shí)了這一過(guò)程。因此，在實(shí)際的應(yīng)用中，把上述幾個(gè)酶的編碼基因克隆并重組成一個(gè)質(zhì)粒，導(dǎo)入已發(fā)現(xiàn)的假單胞菌等芳香族化合物的降解菌，將大大提高轉(zhuǎn)化降解的速率。

　　根據(jù)代謝工程的基礎(chǔ)理論，通過(guò)操作，原則上可以將所有的降解酶基因和質(zhì)粒集合到某一菌株，人工制造出降解各類芳香族化合物的超級(jí)工程菌。但在實(shí)際的操作中，往往存在一些問(wèn)題，無(wú)法達(dá)到預(yù)期的改造效果。

　　生物細(xì)胞經(jīng)過(guò)人工的改造，引入外源基因或改變?cè)械拇x途徑，理論上可以達(dá)到特定的目的，但細(xì)胞本身是一個(gè)整體，物質(zhì)流的改變必然會(huì)影響到能量流，過(guò)量的某種基因的表達(dá)，可能導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)供能不足和內(nèi)部生理功能的混亂，從而影響到對(duì)污染物的降解。對(duì)此，可以考慮利用共代謝降解，通過(guò)投加特定的基質(zhì)，誘導(dǎo)產(chǎn)生新的降解酶，減少酶的表達(dá)數(shù)量，不致出現(xiàn)能量不足的情況。

　　由于質(zhì)粒的遺傳具有相對(duì)的獨(dú)立性，引入微生物細(xì)胞的質(zhì)粒，經(jīng)過(guò)幾代的培養(yǎng)，很可能丟失，導(dǎo)致工程菌失效；進(jìn)入環(huán)境的質(zhì)粒也可能污染其他的菌種，造成潛在的環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)性?？梢詫⒛繕?biāo)基因直接整合到菌株的DNA上，增加遺傳的穩(wěn)定性。

　　另外，芳香族化合物的水溶性一般都比較差，因此在利用微生物降解時(shí)，由于不大容易進(jìn)入細(xì)胞而使生物利用度較低，通過(guò)投加一定量的表面活性劑，可以促進(jìn)芳香族化合物進(jìn)入水相，從而更好地被降解。

　　隨著人們對(duì)芳香族化合物污染的重視程度的提高以及科學(xué)研究的深入，芳香族化合物污染治理取得了一定的進(jìn)展。生物修復(fù)技術(shù)是芳香族化合物污染環(huán)境治理最有前景的手段。對(duì)生物降解途徑的研究，特別是基因序列研究的不斷深入，應(yīng)用代謝工程原理分析降解途徑，并在此基礎(chǔ)上構(gòu)造高效的降解途徑，構(gòu)建高效的基因工程菌，同時(shí)尋找最佳的降解條件，促進(jìn)大氣、水體、土壤各環(huán)境體系中芳香族化合物污染的綜合治理，最終控制和解決芳香族化合物環(huán)境污染問(wèn)題。

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　　[1]第一作者：謝國(guó)建，男，1981年生，碩士研究生，主要研究方向?yàn)榄h(huán)境生物技術(shù)。#通訊聯(lián)系人。