氣相色譜法測(cè)定草莓中9種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留方法研究

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　　摘要：本文研究了草莓中的有機(jī)磷農(nóng)藥(包括甲胺磷、乙酰甲胺磷、治螟磷、氧化樂(lè)果、馬拉硫磷、治螟硫磷、對(duì)硫磷、丙溴磷、三唑磷)殘留檢測(cè)方法。方法：選用乙酸乙酯提取濃縮后經(jīng)活性炭柱凈化，DB-1701毛細(xì)管柱色譜分離，用氣相色譜-FPD檢測(cè)器測(cè)定。結(jié)果9種農(nóng)藥在18 min內(nèi)獲得良好的分離，在0.05-1.0 μg/mL的濃度范圍線性良好，相關(guān)系數(shù)r為0.9982~0.9999，檢測(cè)限可達(dá)0.002~0.08 mg/kg，當(dāng)添加水平為0.5μg//mL時(shí)，本法回收率范圍為87.6%~96.8%。該法快速準(zhǔn)確靈敏，且易操作。

　　關(guān)鍵詞：氣相色譜法；草莓；有機(jī)磷農(nóng)藥殘留

    中圖分類號(hào)：G714    文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A    文章編號(hào)：1005-1422（2014）10-0135-02

    草莓有著“水果皇后”的美譽(yù)。營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，富含維生素C、果糖、蔗糖、檸檬酸、蘋果酸、水楊酸、氨基酸以及鈣、磷、鐵等礦物質(zhì)。中醫(yī)認(rèn)為，草莓具有潤(rùn)肺生津、清熱涼血、健脾解酒、補(bǔ)血益氣等功效。近年來(lái)，草莓作為特種經(jīng)濟(jì)作物已成為我國(guó)一項(xiàng)重要經(jīng)濟(jì)發(fā)展項(xiàng)目。但同時(shí)由于草莓屬草本植物，植株比較低矮、果實(shí)細(xì)嫩多汁，容易導(dǎo)致其受病蟲害和微生物的侵襲。因此，種植草莓的過(guò)程中要經(jīng)常使用農(nóng)藥。不法果農(nóng)甚至為了增產(chǎn)增收，在采收期間，仍會(huì)噴灑甲胺磷等高毒農(nóng)藥。嚴(yán)重影響了果品的質(zhì)量安全，因此食用草莓中毒事件時(shí)有發(fā)生。

　　近年來(lái)，加強(qiáng)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管力度，完善其分析檢測(cè)手段是保障民生的重要舉措之一。為滿足我國(guó)草莓進(jìn)出口貿(mào)易的需要，方法檢出限不僅要滿足我國(guó)的農(nóng)殘限量標(biāo)準(zhǔn)要求，還要滿足歐盟、美國(guó)等其他國(guó)家和地區(qū)的限量標(biāo)準(zhǔn)要求。本文采用乙酸乙酯提取，凈化后DB-1701柱色譜分離，F(xiàn)PD檢測(cè)器快速分析草莓中9種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量，線性相關(guān)系數(shù)r在0.9982~0.9999，最低檢測(cè)限可達(dá)0.002~0.008 mg/kg，完全滿足國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)對(duì)草莓中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測(cè)要求。

　　一、實(shí)驗(yàn)部分

　　1.儀器與試劑

　　安捷倫7890型氣相色譜儀，配有FPD檢測(cè)器。T-25 basic勻漿機(jī)（IKA公司）；N-EVAP-24氮吹儀（美國(guó)Organomation）。

　　乙腈和二氯甲烷，色譜純(Merk公司)；乙酸乙酯、丙酮和正己烷，分析純（重蒸）；無(wú)水硫酸鈉，700 ℃烘烤4 h；有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品購(gòu)于農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所：各濃度農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品均由丙酮稀釋而成，并置于-18 ℃保存。

　　2.實(shí)驗(yàn)方法

   （1）樣品的提取與凈化

　　取適量草莓擦凈，去掉不可食部分后搗碎，稱取10.0 g混勻的試樣，置于50 mL塑料管中，加入5 g無(wú)水硫酸鈉，在混勻器上混勻1min，再加入20 mL乙酸乙酯，在混勻器上充分混勻2 min，以4000 r/min的速率離心4 min，取出上清液。殘?jiān)儆?5 mL乙酸乙酯提取2次，合并3次提取液，于氮吹儀上40 ℃濃縮至1.0 mL，將濃縮過(guò)的提取液過(guò)活性炭小柱，再用5 mL正己烷:丙酮(2?1)的混合液淋洗2次，收集全部洗脫液，40 ℃氮吹濃縮至1.0 mL，供氣相色譜分析。（活性炭小柱預(yù)處理：將其安裝于固相萃取真空抽濾裝置上，用5 mL乙酸乙酯預(yù)淋洗小柱3次。）

　　（2）色譜條件

　　DB-1701（30.0 m×320 μm×0.25 μm）；柱流量3.0 mL/min，氣體流量：N2 60 mL/min，Air 100 mL/min，H2 75 mL/min；溫度：進(jìn)樣口：250 ℃；檢測(cè)器：250 ℃；柱溫：80 ℃（0 min）；以20 ℃/min升至200 ℃（3 min）；以20 ℃/min升至230 ℃（5 min）；以40 ℃/min升至260 ℃（5 min）。進(jìn)樣量1 μL，外標(biāo)法定量。

　　二、結(jié)果與討論

　　1.凈化方法的選擇

　　由于草莓樣品本身果肉多汁，鮮美紅嫩，富含水分和色素。因此，在提取過(guò)程中，為了避免水分對(duì)溶劑提取的干擾和色素對(duì)色譜柱分離的影響，經(jīng)比較，本文選取無(wú)水硫酸鈉+活性炭柱凈化，步驟少、干擾易去除，得到較好的分離效果。

　　2.洗脫劑的選擇

　　本文分別用甲醇、乙腈、丙酮和正己烷四種試劑作洗脫劑。實(shí)驗(yàn)表明，用甲醇洗脫時(shí)，流出液有顏色，色素也被洗脫下來(lái)。而乙腈洗脫時(shí)，對(duì)待測(cè)物的洗脫能力不強(qiáng)，回收率低。用丙酮和正己烷混合溶劑洗脫時(shí)，既保留了色素在凈化柱上，又完全洗脫了有機(jī)磷農(nóng)藥，達(dá)到去除干擾的目的。

　　3.色譜條件的選擇

　　為了提高分析效率、縮短分析時(shí)間，并避免待測(cè)物的熱分解，按色譜條件程序升溫，結(jié)果表明，在18 min 內(nèi)能有效地分離9種有機(jī)磷農(nóng)藥，分離效果及峰形均能滿足方法要求，分離效果如圖 1 所示。

圖19種有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)色譜圖

注：1-甲胺磷；2-乙酰甲胺磷；3-治螟磷；4-氧化樂(lè)果；5-馬拉硫磷；6-殺螟硫磷；7-對(duì)硫磷；8-丙溴磷；9-三唑磷

　　4.標(biāo)準(zhǔn)曲線、線性范圍及檢出限

　　準(zhǔn)確配制5組含量分別為0.05、0.1、0.2、0.5和1 ppm的9種有機(jī)磷農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，按選定的條件實(shí)驗(yàn)，以儀器的3倍噪聲表示檢出限。由表 1 可見(jiàn)，在該色譜條件下，9 種農(nóng)藥均有較寬的線性范圍及較好的線性。
表1草莓中9種有機(jī)磷農(nóng)藥GC測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程和相關(guān)系數(shù)( n=7)

項(xiàng)目
線性范圍
檢測(cè)限
   標(biāo)準(zhǔn)曲線
相關(guān)系數(shù)r
甲胺磷
0.05-1 ppm
0.002mg/kg
Y=10163.80x+4.68412
0.9999
乙酰甲胺磷
0.05-1 ppm
0.002mg/kg
Y=6424.264x+23.2639
0.9999
治螟磷
0.05-1 ppm
0.003mg/kg
Y=8838.593x+52.1131
0.9998
氧化樂(lè)果
0.05-1 ppm
0.004mg/kg
Y=4950.845x+37.3710
0.9996
馬拉硫磷
0.05-1 ppm
0.004mg/kg
Y=3620.486x+25.5042
0.9997
殺螟硫磷
0.05-1 ppm
0.004mg/kg
Y=4241.315x+25.4452
0.9997
對(duì)硫磷
0.05-1 ppm
0.003mg/kg
Y=4508.999x+31.5967
0.9998
丙溴磷
0.05-1 ppm
0.008mg/kg
Y=3417.386x+123.983
0.9982
三唑磷
0.05-1 ppm
0.004mg/kg
Y=3847.973x+33.3934
0.9997

　　5. 加標(biāo)回收試驗(yàn)

　　稱取五份10 g草莓樣品，準(zhǔn)確加入0.5 μg/mL的混標(biāo)1.0 mL，測(cè)得對(duì)照值，計(jì)算平均回收率（n=5）分別為：甲胺磷：96.8%（RSD=1.5%）、乙酰甲胺磷：94.3%（RSD=2.3%）、治螟磷：93.7%（RSD=1.9%）、氧化樂(lè)果：92.5%（RSD=2.4%）、馬拉硫磷：90.1%（RSD=3.2%）、殺螟硫磷：89.4%（RSD=2.8%）、對(duì)硫磷：90.6%（RSD=2.6%）、丙溴磷：87.6%（RSD=3.0%）、三唑磷：92.1%（RSD=2.5%）。

　　三、結(jié)論

　　采用氣相色譜－火焰光度檢測(cè)器( FPD)同時(shí)檢測(cè)草莓中 9種有機(jī)磷農(nóng)藥，方法快速、簡(jiǎn)便，獲得了滿意的分離效果和較高的靈敏度，完全能夠滿足食品中農(nóng)藥殘留衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的要求，適合于草莓中多種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的同時(shí)測(cè)定。

    參考文獻(xiàn):

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